Собранные осенью и высушенные корни культивируемого и {корастущего многолетнего травянистого растения стальника )левого (пашенного) - Ononis arvensis L., сем, бобовых - Fabaceae.
Внешние признаки. Цельное сырье. Цельные или разрезанные корни длиной до 40 см, толщиной 0,5-2,5 см. Корни цилиндрические, слегка сплюснутые, перекрученные, прямые или изогнутые, твердые, деревянистые. Поверхность корней продольно-бороздчатая; пробка местами отслаивается; излом волокнистый. Цвет корня с поверхности светло-коричневый, на изломе желтовато-белый. Запах слабый, своеобразный. Вкус сладковато-горьковатый, слегка вяжущий.
Измельченное сырье. Кусочки корней различной нормы, проходящие сквозь сито с отверстиями диаметром 7 мм. Цвет светло-коричневый или желтовато-белый. Запах слабый, своеобразный. Вкус сладковато-горьковатый, слегка вяжущий.
Микроскопия. На поперечном срезе видно, что корень имеет отчетливо лучистое строение: элементы флоэмы и ксилемы расположены узкими радиальными тяжами и разделены широкими мнногорядными сердцевинными лучами. Во флоэме видны крупные овальные клетки паренхимы, мелкоклеточные проводящие элементы и многоугольные лубяные волокна, расположенные одиночно или небольшими группами. Линия камбия широкая, четко выраженная. Ксилема состоит из сосудов, более узких трахеид, клеток древесной паренхимы и групп волокон либроформа, к которым со стороны сердцевинных лучей прилегают клетки с призматическими кристаллами оксалата кальция. Клетки сердцевинных лучей в коровой части корня тангентально вытянутые, в древесинной - радиально вытянутые с одревесневшими пористыми оболочками. В коровой части в клетках сердцевинных лучей часто встречаются одиночные или по 2-3 призматических кристалла оксалата кальция, в древесинной части сердцевинных лучей часто проходят радиальные тяжи волокон либриформа с кристаллоносной обкладкой. В клетках паренхимы корня содержатся мелкие, простые и 2-4-сложные крахмальные зерна.
Качественные реакции. На полоску фильтровальной бумаги наносят микропипеткой 0,05 мл извлечения (см. раздел "Количественное определение") и просматривают в УФ-свете; наблюдается голубая флюоресценция, усиливающаяся при обработке пятна парами аммиака, (изофлавоноиды).
Числовые показатели. Цельное сырье. Изофлавоноидов не менее 1,5%; влажность не более 14%; золы общей не более 10%, других частей стальника не более 2%; органической примеси не более 1%; минеральной примеси не более 1%.
Измельченное сырье. Изофлавоноидов не менее 1,5%; влажность не более 14%; золы общей не более 10%; корней, почерневших в изломе, не более 1%; других частей стальника не более 2%; частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 7 мм, не более 10%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, не более 10%; органической примеси не более 1%; минеральной примеси не более 1%.
Количественное определение. Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. Около 2 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в коническую плоскодонную колбу вместимостью 100 мл с притертой пробкой, прибавляют 40 мл 70% спирта, закрывают колбу пробкой и взвешивают (с погрешностью ± 0,01 г). Затем колбу соединяют с обратным холодильником, нагревают содержимое колбы на водяной бане до кипения и поддерживают слабое кипение в течение 2 ч. После охлаждения колбу вновь закрывают пробкой, взвешивают, убыль в массе наполняют 70% спиртом и настаивают при периодическом взбалтывании в течение 1 ч. Затем извлечение фильтруют через сухой бумажный фильтр в сухую колбу вместимостью 50 мл. Отбирают пипеткой 0,5 мл фильтрата, переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора 70% спиртом до метки. Оптическую плотность полученного раствора измеряют на спектрофотометре при длине волны 260 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют 70% спирт.
Параллельно измеряют оптическую плотность раствора ГСО ононина.
Содержание изофлавоноидов в пересчете на абсолютно сухое сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:
| X = | D • 40 • m 0 • 100 • 100 • 100 • 1 |
|
|
|
| D 0 • m • 0,5 • (100 - W) • 25 • 10 |
где D - оптическая плотность испытуемого раствора; D 0 - оптическая плотность раствора ГСО ононина; m 0 - масса ГСО ононина в граммах; m - масса сырья в граммах; W - потеря в массе при высушивании сырья в процентах.
Допускается проводить определение с использованием калибровочного графика. В этом случае содержание изофлавоноидов в пересчете на абсолютно сухое сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:
| X = | C • 40 • 100 • 100 • 100 |
|
|
|
| m • 0,5 • 1000 • (100 - W) |
где С - количество изофлавоноидов в 1 мл испытуемого раствора, найденное по калибровочному графику, в миллиграммах; m - масса сырья в граммах; W - потеря в массе при высушивании сырья в процентах.
Построение калибровочного графика. Около 0,02 г (точная навеска) Государственного стандартного образца ононина, высушенного до постоянной массы, растворяют в 70% спирте в мерной колбе вместимостью 100 мл (исходный раствор). Отбибирают по 0,05; 0,10; 0,15; 0,20; 0,25; 0,30; 0,35; 0,40; 0,45; 0,50; 0,55; 0,60 мл приготовленного раствора в мерные колбы вместимостью 10 мл и доводят объем растворов 70% спиртом до метки. Оптическую плотность полученных растворов измеряют на спектрофотометре при длине волны 260 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения 70% спирт.
Для построения калибровочного графика на оси абсцисс откладывают количество ГСО ононина в 1 мл спектрофотометрируемого раствора в миллиграммах согласно таблице, а на оси ординат - соответствующие значения оптической плотности.
| № п/п | Количество исходного раствора, мл | Количество ГСО ононина в 1 мл испытуемого раствора, в мг | № п/п | Количество исходного раствора, мл | Количество ГСО ононина в 1 мл испытуемого раствора, в мг |
| 1 | 0,05 | 0,001 | 7 | 0,35 | 0,007 |
| 2 | 0,10 | 0,002 | 8 | 0,40 | 0,008 |
| 3 | 0,15 | 0,003 | 9 | 0,45 | 0,009 |
| 4 | 0,20 | 0,004 | 10 | 0,50 | 0,010 |
| 5 | 0,25 | 0,005 | 11 | 0,55 | 0,011 |
| 6 | 0,30 | 0,006 | 12 | 0,60 | 0,012 |
Примечание. Приготовление раствора Государственного стандартного образца (ГСО) ононина: около 0,02 г (точная навеска) ГСО ононина, высушенного до постоянной массы, растворяют в мерной колбе вместимостью 25 мл в небольшом количестве 70% спирта и доводят объем до раствора 70% спиртом до метки; 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл и доводят объем раствора 70% спиртом до метки. Раствор используют свежеприготовленным.
Упаковка. Цельное сырье упаковывают в тюки из ткани не более 50 кг нетто, измельченное - в мешки тканевые или льно-джуто-кенафные не более 30 кг нетто.
Срок годности 2 года.